高效毛细管等速电泳色谱仪分析技术消防泵
高效毛细管等速电泳色谱仪分析技术
高效毛细管等速电泳色谱仪(CITP)是采用先导电解质和尾随电解质,利用待测离子淌度的不同进行分离。
一、CITP条件:1、特殊的电解质系统:(1)前导电解质:淌度比样品中任何离子的淌度都大并具有一定缓冲能力的离子。(2)尾随电解质:淌度比样品中任何离子的淌度都小并具有一定缓冲能力的离子。(3)对离子:以满足系统电中性的要求。CZE整个系统都充满同一种电解质(背景电解质或支持电解质),它起运载电流的作用,并具有一定缓冲能力。在CITP中,不加入这样的背景电解质。2、背景电流要小到足以克服区带电泳效应:CITP要求溶剂的自身电导可忽略不计。由于没有背景电解质的背景电流,电渗流为零,各区带相互连接。二、工作原理:采用两种不同浓度的电解质。一种为前导电解质,淌度比样品中任何离子的淌度都大并具有一定缓冲能力,充满整个毛细管,并加入到毛细管末端的电解槽中。另一种为尾随电解质,淌度比样品中任何离子的淌度都小并具有一定缓冲能力,加入到毛细管起始端的电解槽中。样品加在先导电解质和尾随电解质之间,系统中加入对离子以满足电中性的要求。利用待测离子淌度的不同进行分离,达到平衡时,各离子区带上电场强度的自调节作用使各离子区带具有相同的迁移速度,逐渐形成各自独立的区带而达到分离。不同离子的淌度不同,所形成区带的电场强度不同,淌度大的离子区带的电场强度小。沿出口到进口,将不同区带依次排序为1、2、3…,电场强度依次增大。假设2号区带中的离子扩散到3号区带,3号区带的电场强度大,离子被加速使之返回到2号区带。假设2号区带中的离子扩散到1号区带,离子被减速使之返回到2号区带。从而使各区带形成鲜明的界面。三、特点:1、CITP在自由溶液中进行,一般用恒流操作模式。2、属于不连续介质电泳,需要两种电解质。3、具有自锐化效应,区带界面明显,有富集和浓缩作用。4、空间分辨率差。四、应用:较早采用的分离模式,目前应用不多。常用作柱前浓缩以富集样品。
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